التحليل الكيميائي للدم

يشمل التحليل الكيمائي للدم تقدير المركبات العديدة التي توجد في الدم مثل الجلوكوز – البولينا – حمض البوليك – الصوديوم والبوتاسيوم – البروتينات – الانزيمات – الهرمونات ......
سنتناول في هذا الدليل شرح الاختبارات التي ينبغي إجراؤها في المعامل والتي تتوافر الإمكانيات لإجرائها.
فكرة تقدير المركبات الكيميائية في الدم
تعتمد معظم هذه الفحوص علي تفاعل كاشف أو كواشف مع المركب المطلوب تقديره وينتج عن هذا التفاعل محلول ملون تقاس كثافته باستخدام أجهزة القياس الضوئي أو أجهزة القياس الضوئي الطيفي Colorimeters or- spectrophotometers مقارنة بمحلول قياس ( معياري)
العينة Specimen
يفضل استخدام المصل في معظم الاختبارات ويفضل دائما إجراء الاختبار بعد فصل المصل Serum ، وإذا تأخر أجراء التحليل يحفظ المصل في الثلاجة . وبصفة عامة يفضل إجراء الاختبارات علي عينة صيام.
المحلول القياسي ( المعياري) Standard Solution
هو محلول يتم تحضيره بتركيز معروف من المادة المراد تقديرها ويعامل في الاختبار مثل العينة – مثلا المحلول القياسي للجلوكوز هو محلول مائي علي تركيز معروف من الجلوكوز النقي الجاف.
كيفية استخدام أجهزة القياس الضوئي للحصول علي النتائج
تشتمل هذه الأجهزة علي نوعين من القياسات.
الامتصاص Absorbance "A"
النفاذية Transmittance "T"
الخطوات :
يضبط الطول الموجي المناسب لقراءة الاختبار
يضبط صفر الامتصاص (A) بالمحلول الخالي ( البلانك Blank )
تقرا أنبوبة العينة ( الاختبار T)
ثم تحسب قيمة المركب ( النتيجة) باستخدام المعادلة آلاتية :
قراءة الاختـــبـار/ قراءة المحلول القياسي X تركيز المحلول القياسي = ... مجم / ديسيليتر
AT / AS X Cs = mg/dl
حيث أن :
A الامتصاص
T قراءة الاختبار
S قراءة المحلول القياسي
Cs تركيز المحلول القياسي
mg/dl قيمة المركب مقدرة بالميلجرام في كل 100 مل من الدم (ديسيليتر)
استخدام العبوات الجاهزة Kits
تستخدم معظم المعامل حاليا عبوات جاهزة ( أطقم) (Kits) تنتجها العديد من الشركات المتخصصة تحتوي علي جميع المحاليل والكواشف اللازمة لأجراء الاختبار.
وسنتناول فكرة ( أساس) الطرق الشائعة للاختبارات دون التطرف لتفاصيل خطوات الاختبار والتي تختلف تبعا للطريقة التي تقوم الشركة باستخدامها وسنذكر كمثال خطوات تقدير الجلوكوز في الدم ( راجع تقدير الجلوكوز)
الاحتياطات الواجب مراعاتها لضمان سلامة استخدام أطقم الاختبارات Kits
1. حفظ الأطقم في درجة الحرارة المناسبة والمبينة علي العبوة من الخارج.
2. عدم استخدام المحاليل والكواشف بعد انتهاء فترة صلاحيتها طبقا للتاريخ المدون علي العبوة وعلي زجاجات الكواشف.
3. دراسة النشرة جيدا وإتباع آلاتي بكل دقة.
الخطوات المدونة لأجراء الاختبار.
استخدام الطول الموجي المطلوب.
محلول البلانك الواجب استخدامه.
فترة ودرجة حرارة التحصين إن وجد.
طريقة حساب النتائج.
المعدل المرجعي ( المعدل الطبيعي) المدون بالنشرة.
أي ملاحظات خاصة أخري.
ملاحظات :
بعض الأطقم تحتوي علي محاليل مركزة ينبغي تخفيفها بالنسبة المطلوبة وبعضها قد يحتوي علي الكاشف علي هيئة بودرة تذاب في الحجم المدون بالنشرة ، ويراعي فترة الصلاحية بعد التحضير وتكتب علي الزجاجات التي تم تحضيرها بطريقة واضحة وتحفظ في درجة الحرارة المناسبة.
تقوم الشركات بترقيم الكواشف لسهولة تداولها أثناء العمل وتكتب كآلاتي ...... R2- R3– ( R ).R1-اختصار Reagent . ويراعي عند إجراء الاختبار ومنع الكواشف طبقا للترتيب الموجود في الجدول.
الاحتياجات التي ينبغي مراعاتها عند استخدام أجهزة القياس الضوئي :
ضرورة استخدام محلول البلانك لضبط صفر الامتصاص والذي يلغي تداخل الامتصاص الذي يمكن أن ينتج من الكواشف ويجب استخدام وتحضير البلانك بالطريقة المدونة بالنشرة ، والمحلول الخالي ( البلانك) هو محلول يحتوي علي الكواشف التي تستخدم في الاختبار ولا يحتوي علي المركب الذي نقوم بتقديره.
إستعمال كوفيت Cuvettes نظيفة وجافة مع مراعاة تنظيفها من الخارج قبل وضعها في الجهاز.
تجنب وجود فقاعات هواء في الكوفيت مع وضع الحد الأدنى من المحلول والذي يختلف تبعا لنوع الكوفيت.
التأكد من وضع سطح الكوفيت المحدد لمرور الضوء مواجها للمصدر الضوئي.
غلق المكان ووضع الكوفيت قبل القراءة حيث أن ضوء الشمس والمصابيح الكهربائية يؤثر علي القراءة.